Cell：抗HIV-1天然免疫辅助受体新发现

众所周知，树突状细胞（Dendritic Cell，简称DC）是天然免疫的重要屏障，也是连接天然免疫与后天免疫的重要纽带。人类的DC由于存在一类叫做SAMHD1的磷酸水解酶蛋白，因而能够 降解胞内的核酸物质，从而使得DC本身对HIV-1十分耐受。之前的研究通过向DC内部导入一类HIV-2/SIV 分泌的Vpx蛋白（可以促使SAMHD1的泛素化与水解），从而成功诱导了DC的HIV-1感染效果。该实验证明这一条件不仅能够促使HIV-1在细胞内 部的增殖，而且也能够促使细胞分泌IFN。

对于IFN的产生，之前的研究报道了很多相关的信号通路，而其中十分重要的一类是cGAMP合成酶对DNA的识别引起的IFN的表达。尽管之前 有研究发现cGAMP能够参与HIV-1的天然免疫反应，但HIV-1相关的PAMP与cGAMP是否存在直接的相互作用仍不清楚。最近，来自美国 Sanford-Burnham医学研究所的Sumit K. Chanda课题组在《Cell》杂志发表了他们对于这一问题的最新研究成果。

首先，作者以小鼠骨髓来源的DC(BMDC)为研究对象，通过体外的HIV-1模拟感染（加入SIV-Vpx蛋白进行辅助）发现BMDC能够产 生显著的IFN的表达，这一实验证实了之前的研究结果。同时，作者验证了IFN相关的蛋白的表达或活化（ISG54，p-IRF3等）。通过药物抑制的处 理（Nevirapine是一类HIV-1 RNA反转录抑制剂；Raltegravir是一类HIV-1 DNA的基因组整合抑制剂），作者发现Nevirapine能够明显降低ISG54的表达，而Raltegravir则没有这一效果。该实验证明HIV- 1的反转录对于抗病毒免疫反应十分重要。

之后，作者利用RNAi筛选的方式寻找是否存在识别HIV-1 DNA从而介导IFN表达的中间信号分子。通过小RNA的转染，分别对BMDC中的每个可能的基因进行敲低，之后进行HIV的感染实验并检测最终 ISG54的表达。最终，作者找到了26个可能的基因，它们的敲低能够显著降低ISG54的表达。进一步的验证实验证明PQBP1是其中作用最为明显的分 子。之前的研究发现PQBP1是一类多聚谷氨酰胺结合蛋白，这一蛋白的突变能够造成严重的神经退行性疾病。作者以诱导后的THP-1细胞进行实验，发现 PQBP1能够引起THP1细胞中ISG54的表达，并且作用于IKK与IRF-3的上游。

之后，作者猜测PQBP1可能能够与HIV-1的相关蛋白进行相互作用，为了研究这一问题，作者利用了免疫共沉淀技术分析了病毒感染后与 PQBP1相互作用的病毒核酸分子。结果显示，病毒感染后能够引起明显的PQBP1与HIV-1核酸的相互作用，进一步的Dnase/Rnase处理显示 与PQBP1相互作用的核酸物质是DNA而非RNA。

进一步，作者发现将BMDC中cGAS进行敲低能够影响HIV-1引起的IFN信号，由于之前研究证实cGAS是重要的DNA免疫反应元件，这 一结果说明cGAS可能参与了PQBP1介导的抗HIV-1天然免疫反应。通过一系列shRNA干扰的手段，作者发现PQBP1能够引发cGAMP介导的 抗DNA天然免疫反应。最终，作者通过生化手段证明了PQBP1与cGAMP在病毒感染之后会发生明显的相互作用。

综上，作者通过RNAi 筛选的手段鉴定出了cGAMP识别HIV-1 DNA并引起免疫反应过程中重要的辅助类受体物质，PQBP1。（生物谷bioon.com）